1、病毒传播方式多样
自非洲猪瘟发生以来，猪场通过延长隔离时间、增加淋浴频次以及增加病原检测的方式降低人员和污染物机械性传播ASFV成为重要的手段。但对于入场人员的隔离时间一直是有争议的话题，非洲猪瘟发生之前对于入场人员的隔离时间要求从24-72小时不等。
近几年，特别是非瘟发生之后，整个养猪行业通过增加入场人员的隔离时间和病原检测来减少通过人员和污染物携带病毒入场的风险，即便是在缺少数据支撑的情况下，对于入场人员的隔离时间要求普遍是48-72小时甚至更长的隔离时间。Scott Dee 曾经在试验调查中证明在不考虑隔离时间的情况下通过基本的卫生处理，比如淋浴和更换衣物和鞋子也可以有效阻止PRRSV进行机械性的传播[1]。本文主要通过验证淋浴对降低人员携带病毒载量的有效性和猪场浴室的设计两个方面来浅谈如何确保猪场进行有效性淋浴。
2、淋浴试验
为了验证淋浴对降低病毒载量的有效性，我们通过设计人员在接触到PEDV活病毒后，通过采样、淋浴和更换干净衣物等重复性操作来模拟现阶段人员淋浴频率和淋浴时间的试验进行验证。
1. 材料与方法
试验方法：模拟猪场人员集中进场淋浴方式，使用PEDV分离液（10的5.8次方 TCID50）涂抹于试验组人员（2男、2女）的头发、手部、胳膊、腿部。同时设置阴性对照组，使用生理盐水涂抹于对照组（2男2女）的头发、手部、胳膊、腿部。该试验的执行场所为猪场浴室，试验执行人员为猪场内部员工。试验人员按照猪场既定的《人员入场操作规范》中的淋浴要求进行淋浴：1）确保淋浴时间不低于10分钟；2）头发必须使用洗发揉搓；3）身体必须使用沐浴露发泡；4）手和手指甲使用洗手刷刷洗不低于30秒。本次试验进行2次重复，每次试验员工重复3次淋浴操作。第一次试验的三次淋浴在一个浴室内操作；第二次试验的三次淋浴在三个浴室内操作。浴室在使用前后按照《环境采样操作规范》进行环境采样。试验人员涂抹病毒后，在每次淋浴前进行采样。所有的样品一式两份，送至2个实验室进行平行检测。对于实验室检测可疑或者阳性的样品进行病毒活性试验，该试验使用5头3-5日龄PEDV双阴仔猪作为攻毒对象。1号仔猪使用PEDV分离液作为阳性对照， 2-3号仔猪用于将实验室检测阴性的部分样品合样为一个阴性攻毒组，4-5号仔猪用于实验室检测可疑或者阳性的样本合样作为阳性攻毒组。每头仔猪口服样品2毫升。所有仔猪持续观察72小时，每间隔12小时采集一次肛拭子检测PEDV抗原,最后采集所有猪只肠道检测PEDV抗原。所有样品一式两份，分别送至实验室检测。
2.试验结果：
2.1 淋浴试验：
通过试验人员在淋浴前和淋浴后的采样检测结果可以得知，在经过一次淋浴后可以有效降低人员携带病毒的载量。实验室的检测结果显示，在淋浴前，对人员体表携带的PEDV 的检测CT值为23.25-33.34，经过淋浴后，有2名男性人员和1名女性人员在实验室B检测到PEDV，但是在实验室A的检测结果中，所有人员的检测均为PEDV阴性。对于实验室的两个不同的检测结果，并不能排除实验室是否存在检测误差。
第一次试验人员淋浴前后的采样检测结果汇总
第二次试验人员淋浴前后的采样检测结果汇总
3、病毒活性检验结果
不同类型样品攻毒后采样检测PEDV结果
注：1号仔猪仔猪攻毒样品为PEDV病毒分离液；2号和3号仔猪攻毒样品为采样后检测阴性样品；4号和5号仔猪攻毒样品为两次试验中检测到可疑和阳性的合样样品。
攻毒试验结果显示，1号仔猪在攻毒后的36小时出现腹泻，采集肛拭子和安乐死采取肠道组织的实验室RT-PCR的检测结果为阳性，CT值分别为24.30和19.37。2号仔猪在攻毒期间出现死亡，但是肛拭子和肠道组织的RT-PCR检测结果显示均为PEDV阴性。3号仔猪以及4-5号仔猪在整个攻毒试验过程中均为未出现临床症状，在试验观察期结束后进行安乐死并采集肛拭子和肠道组织检测PEDV结果均为阴性。该攻毒试验说明，经过淋浴后采集到的样本并没有引起仔猪发病，实验室检测到的样本可能为残留的病毒核酸或者实验室的检测误差导致。
4、淋浴试验小结
入场人员通过淋浴的方式可以有效降低体表携带病毒的载量。在淋浴过程中，人员的淋浴方式也是极其重要的，比如是否确保洗发水和沐浴露充分与头发及体表进行接触，而不是使用清水一带而过。病毒活性检验试验说明，淋浴后采集的样品中可能还会存在病毒被灭活后的核酸，但已无法感染猪只。或者是实验室存在检测假阳性的可能性，导致两个实验室检测结果不一。
上文的淋浴试验可以有效的降低入场人员体表携带病毒的载量，那么浴室设计过程中充分考虑如何让员工打心眼里地想洗澡，洗好澡，好好洗，确保人员在淋浴的过程中不会出现交叉污染，而人为将病原菌由浴室脏区带入到浴室净区是非常重要的一个方面。
对于浴室的设计，我们需要重点考虑以下几个方面：
1. 通过设定条凳脱鞋，降低人员通过鞋底将病原菌带入到净区
Anderson等人[2]在2018年就通过试验评估证明，在洗澡间门口设置条凳供员工脱鞋和摆放，可有效降低条凳后区域的污染情况。（图片来源于托佩克）
2.正确理解“三段式”淋浴
非瘟之后，很多的养殖企业对原有猪场进行了生物安全升级改造，增加了浴室的三段式淋浴通道。但本人在走访了许多猪场之后发现，很多猪场虽然理解在浴室的设计过程中需要使用三段式的淋浴通道， 但是在最后呈现的结果中仍然存在一些设计缺陷，导致人员在淋浴过程中存在交叉污染的风险。（如下图）
3. 确保为员工提供一个舒适的淋浴环境
3.1 确保冬季浴室内的保温：
对于北方猪场而言，浴室保温是设计浴室过程中肯定会去考虑的事情。对于一些中小规模的猪场，并没有过多考虑这个事情，导致浴室在冬季成为一个摆设，或者即便强迫员工洗澡，淋浴效果也会大打折扣。但是对于南方猪场而言，由于纬度较低，气候相对温暖，很多猪场在设计浴室的时候不会考虑浴室的保温问题，但是到了冬季，虽然气温在0℃以上，但是由于环境气温较低，也会影响员工淋浴的心情，可能会造成淋浴效果较差。
3.2 提供充足可供使用的淋浴用品
有些猪场的浴巾是按人分配，员工进、出浴室淋浴都会使用同一条浴巾，一方面会因使用后的浴巾没有及时清洁，致使浴巾在下次使用的时候可能成为一个新的污染源。同时浴室内需要匹配充足的淋浴用品（包括洗发水和沐浴露）。
3.3 定期维护、维修淋浴设备
浴室建设完成后，并不是一直使用不坏的。需要定期的维修和更换淋浴设备，特别是淋浴喷头，出水量过少会导致没有足够的水流量，造成淋浴效果较差。
5、总结：
通过有效的淋浴和更换干净的衣物以及鞋子，可以有效地防止人员或污染物经过机械传播至场内感染猪只。有效的淋浴需要制定严格的淋浴操作规范和科学的浴室设计，充分从如何确保员工能真正想洗澡的角度去考虑，而不是一味的想着如何强制员工洗澡，员工的淋浴心情不爽，淋浴的效果肯定会打折扣。
参考文献：
1. Pitkin A, Otake S, Dee S. A one-night downtime period prevents the spread of porcine reproductive and respiratory syndrome virus and Mycoplasma hyopneumoniae by personnel and fomites (boots and coveralls). J Swine Health Prod. 2011;19(6):345–348.
2.Anderson AV, Fitzgerald C, Baker K, et al. Comparison of shower-in and shower-in plus bench entry protocols for prevention of environmental contamination due to personnel entry in a commercial swine facility. J Swine Health Prod. 2018;26(4):192-199.
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